بافر TBE 100X

معرفی محصول:بافر TBE 100X با کد محصول T7820B، یک محلول غلیظ و حیاتی در دنیای بیولوژی مولکولی و ژنتیک است که توسط شرکت‌های معتبر تولید و عرضه می‌شود. این محصول به صورت یک محلول 100X یا به عبارتی 100 برابر غلیظ ارائه شده است، به این معنی که برای رسیدن به غلظت کاری استاندارد 1X، کافی است یک حجم از آن را با 99 حجم آب مقطر یا آب دیونیزه رقیق کنید. این ویژگی باعث می‌شود که نگهداری، حمل و نقل و استفاده از آن بسیار راحت و اقتصادی باشد.

ماده اصلی این بافر، Tris-Borate-EDTA است. هر کدام از این ترکیبات نقش مهمی در فرآیند الکتروفورز ژل ایفا می‌کنند:

• تریس (Tris-hydroxymethyl aminomethane): این ترکیب نقش اصلی را در حفظ pH بافر ایفا می‌کند. تریس به عنوان یک بافر اساسی عمل کرده و pH محیط را در محدوده قلیایی (حدود 8.3) ثابت نگه می‌دارد. این pH قلیایی، نوکلئیک اسیدها (DNA و RNA) را در حالت یونی با بار منفی قرار می‌دهد که برای حرکت آنها در میدان الکتریکی لازم است.
• اسید بوریک (Boric Acid): اسید بوریک، همراه با تریس، یک سیستم بافر قوی تشکیل می‌دهد که پایداری pH را در طول الکتروفورز تضمین می‌کند. این ترکیب به جلوگیری از تغییرات pH ناشی از الکترولیز آب کمک می‌کند.
• EDTA (Ethylenediaminetetraacetic acid): EDTA یک عامل کیلیت‌کننده است. وظیفه اصلی آن، به دام انداختن و غیرفعال کردن یون‌های فلزی دوظرفیتی مانند Mg2+ است. بسیاری از آنزیم‌های تجزیه‌کننده نوکلئیک اسید (نوکلئازها) برای فعالیت خود به این یون‌ها نیاز دارند. با غیرفعال کردن این یون‌ها، EDTA از تجزیه شدن نوکلئیک اسیدها توسط نوکلئازها جلوگیری کرده و یکپارچگی و سلامت باندهای DNA و RNA را در طول آزمایش حفظ می‌کند.

ترکیب این سه ماده در بافر TBE، محیطی ایده‌آل را برای جداسازی و تفکیک باندهای نوکلئیک اسید در ژل آگارز فراهم می‌آورد. این بافر به ویژه برای جداسازی قطعات کوچک تا متوسط DNA (کمتر از 1500 جفت باز) و همچنین قطعات RNA بسیار مناسب است.

اهمیت و کاربردهای بافر TBE

الکتروفورز ژل آگارز یک تکنیک استاندارد در آزمایشگاه‌های زیست‌شناسی مولکولی برای جداسازی ماکرومولکول‌ها بر اساس اندازه و بار الکتریکی آنهاست. بافر در این فرآیند نقشی حیاتی دارد. بدون یک بافر مناسب، میدان الکتریکی نمی‌تواند به طور مؤثر اعمال شود و pH محیط به سرعت تغییر می‌کند که منجر به تخریب نمونه‌ها و نتایج نامناسب می‌شود.

بافر TBE 100X به دلیل ویژگی‌های برجسته‌اش، در طیف گسترده‌ای از کاربردها مورد استفاده قرار می‌گیرد:

1. الکتروفورز محصولات PCR: یکی از رایج‌ترین کاربردها، جداسازی و بررسی محصولات حاصل از واکنش زنجیره‌ای پلیمراز (PCR) است. بافر TBE، تفکیک واضح و دقیقی از باندهای PCR با اندازه‌های مختلف فراهم می‌کند.
2. کلونینگ مولکولی: در فرآیندهای کلونینگ، نیاز به جداسازی قطعات DNA حاصل از هضم آنزیمی است. بافر TBE به این منظور استفاده شده و جداسازی قطعات را برای استخراج از ژل تسهیل می‌کند.
3. بررسی کیفیت DNA و RNA: پژوهشگران از الکتروفورز برای بررسی کیفیت و سلامت DNA یا RNA استخراج‌شده استفاده می‌کنند. بافر TBE با حفظ پایداری نمونه، نتایج قابل اعتمادی ارائه می‌دهد.
4. تکنیک‌های هیبریداسیون: در تکنیک‌هایی مانند سوترن بلاتینگ (Southern Blotting) و نورترن بلاتینگ (Northern Blotting) که شامل انتقال نوکلئیک اسید از ژل به ممبران است، بافر TBE نقش مهمی در انتقال مؤثر و حفظ یکپارچگی نمونه‌ها دارد.
5. مطالعات بیوشیمیایی و ژنتیکی: این بافر به طور کلی در هر پژوهشی که نیاز به جداسازی و آنالیز نوکلئیک اسیدها داشته باشد، ابزاری ضروری و کاربردی است.

مزایای کلیدی بافر TBE 100X

استفاده از بافر TBE 100X مزایای متعددی را به همراه دارد که آن را به گزینه‌ای ایده‌آل برای آزمایشگاه‌ها تبدیل می‌کند:

• آماده‌سازی آسان: این محصول به صورت غلیظ و آماده استفاده عرضه می‌شود. کاربران تنها با افزودن آب مقطر می‌توانند بافر کاری را تهیه کنند، که این امر خطر خطای انسانی در تهیه محلول را به شدت کاهش می‌دهد.
• پایداری pH بالا: سیستم بافر تریس-بورات در TBE، پایداری pH فوق‌العاده‌ای در طول الکتروفورز فراهم می‌کند. این امر به ویژه در آزمایش‌هایی با ولتاژ بالا که تولید گرما و تغییرات pH را به دنبال دارد، حائز اهمیت است.
• کیفیت و خلوص بالا: بافر TBE با کد T7820B با استفاده از مواد شیمیایی با گرید بالا تولید می‌شود، که خلوص و کارایی آن را تضمین می‌کند.
• عمر مفید طولانی: فرمولاسیون غلیظ 100X باعث می‌شود که محصول در صورت نگهداری مناسب، برای مدت طولانی قابل استفاده باشد و از هدر رفت مواد جلوگیری کند.
• نتایج واضح و دقیق: استفاده از این بافر به دلیل هدایت الکتریکی پایدار و حفظ pH، منجر به جداسازی واضح و تفکیک دقیق باندهای نوکلئیک اسید می‌شود که برای تحلیل‌های کمی و کیفی ضروری است.

نکات مهم در استفاده و نگهداری

برای اطمینان از بهترین عملکرد بافر TBE 100X، رعایت نکات زیر ضروری است:

• رقیق‌سازی: همیشه با دقت و با استفاده از آب مقطر یا دیونیزه با کیفیت بالا، محلول را رقیق کنید. نسبت 1 به 100 را به درستی رعایت کنید. برای مثال، برای تهیه 1 لیتر بافر 1X، 10 میلی‌لیتر از بافر 100X را به 990 میلی‌لیتر آب اضافه کنید.
• ذخیره‌سازی: بافر 100X را در دمای اتاق نگهداری کنید. اما محلول 1X رقیق‌شده را بهتر است در دمای 4 درجه سانتی‌گراد (یخچال) نگهداری کنید تا از رشد میکروبی جلوگیری شود.
• استفاده مجدد: بافر TBE را می‌توان برای چند بار در یک سری آزمایش استفاده کرد. با این حال، با استفاده مکرر، pH بافر ممکن است تغییر کند و هدایت الکتریکی آن کاهش یابد. در صورت مشاهده کاهش عملکرد، باید بافر جدیدی تهیه شود.
• ایمنی: هنگام کار با هر ماده شیمیایی آزمایشگاهی، از دستکش و عینک ایمنی استفاده کنید.

مقایسه بافر TBE با سایر بافرها (مانند TAE)

در الکتروفورز، دو بافر رایج TBE و TAE (Tris-Acetate-EDTA) هستند. هرچند هر دو برای جداسازی DNA استفاده می‌شوند، تفاوت‌های مهمی دارند:

• هدایت الکتریکی: بافر TBE هدایت الکتریکی پایین‌تری نسبت به TAE دارد. این امر باعث می‌شود که در ولتاژهای بالا، گرمای کمتری تولید شود و بنابراین برای ژل‌های با ران طولانی‌تر مناسب‌تر است.
• توانایی بافرینگ: TBE توانایی بافرینگ بالاتری دارد، به این معنی که pH آن در طول الکتروفورز پایدارتر باقی می‌ماند و می‌توان از آن برای دفعات بیشتری استفاده کرد.
• جداسازی: TBE برای جداسازی قطعات DNA کوچک (کمتر از 1500 جفت باز) به ویژه در ژل‌های با غلظت بالا، تفکیک بهتری فراهم می‌کند. در مقابل، TAE برای جداسازی قطعات بزرگ‌تر مناسب‌تر است.

بنابراین، بافر TBE 100X (کد T7820B) به طور خاص برای کاربردهایی که نیاز به تفکیک دقیق قطعات DNA کوچک و متوسط دارند، مانند الکتروفورز محصولات PCR، انتخابی برتر است.

نتیجه‌گیری

بافر TBE 100X (کد T7820B) یک محصول با کیفیت و ضروری برای هر آزمایشگاه زیست‌شناسی مولکولی است. این محلول غلیظ، آماده و حاوی ترکیبات حیاتی برای انجام موفقیت‌آمیز الکتروفورز ژل آگارز است. با ایجاد شرایط بهینه pH و محافظت از نوکلئیک اسیدها در برابر تخریب، این بافر نتایج دقیق و واضحی را برای کاربردهای مختلف تحقیقاتی و تشخیصی تضمین می‌کند. استفاده از بافر TBE 100X، راهکاری مطمئن و کارآمد برای پژوهشگران است که به دنبال نتایج قابل اعتماد و تکرارپذیر هستند.